En nuestro laboratorio empleamos técnicas de biología
molecular para la identificación, como PCR convencional,
que permite diferenciar los serogrupos A, B y C.
De momento no existen pruebas de detección
molecular que permitan diferenciar las
serovariedades C1, C2, C3 y C4.
ERIC-PCR es utilizada para conocer genotipos
y establecer estudios epidemiológicos.
ERIC-PCR también revela la posible
diversidad genética entre serogrupos
(A, B y C), con la salvedad de que el material
genético de las bacterias a analizar debe ser
evaluado el mismo día de la recolección de
muestras para evitar resultados imprecisos.
Las pruebas moleculares para esta bacteria
requieren una interpretación muy minuciosa
El aislamiento y la identificación microbiológica
requieren de personal con experiencia en el cultivo de
este microorganismo. Avibacterium paragallinarum es
una bacteria fastidiosa de cultivar. En nuestro laboratorio
utilizamos un medio de cultivo desarrollado
localmente (medio PUMA), el cual es óptimo
para el aislamiento y cultivo de la bacteria.
En este medio, Avibacterium se multiplica fácilmente y
se facilita la selección de colonias bacterianas para su
evaluación a diferencia de otros medios convencionales
(gelosa sangre con cepa nodriza y/o agar chocolate).
Ya aislada la bacteria es aconsejable seleccionar
al menos tres colonias bacterianas para su
serotipificación, ya que puede ocurrir que haya más de
una serovariedad o serogrupos en una misma ave.
Recientemente hemos aislado Avibacterium paragallinarum
serogrupos B y C procedentes de una sola ave.
Para la realización de la prueba se requiere que
los antisueros sean adsorbidos con eritrocitos
de aves fijados en glutaraldehído, además de
adsorberse entre las distintas serovariedades.
La interpretación no es sencilla, pues puede observarse
reactividad cruzada con algunas serovariedades; por
ejemplo, C2 con C3 o con C4, así que la asignación
de serovariedades algunas veces es difícil y no del
todo confiable, ya que entre una serovariedad y
otra pueden existir diferencias mínimas en el título
serológico. Ha acontecido con alguna frecuencia
que la misma cepa, en un laboratorio es clasificada
como C1 y en otro laboratorio como C2, lo cual
también puede obedecer a intereses comerciales.
Dada la complejidad y la limitada utilidad que tiene
el sistema de Kume para lograr eventualmente
el control de la enfermedad, este sistema se
ha dejado de usar en los laboratorios de
diagnóstico y el esquema de Page sigue
siendo el más empleado (serogrupos A, B y C).
Metodología
Aislamiento e identificación
patología
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aviNews A.Latina Diciembre 2017 | Coriza Infecciosa: La Amenaza Constante